Маркеры микроорганизмов в составе жирных кислот мочи и эякулята мужчин и исследование их диагностической значимости

  • Главная
  • Статьи

Заболевания урогенитальной сферы мужчин — уретрит, простатит, орхит до сих пор занимают важное место в проблеме здоровья и продуктивности человека. На рубеже нового тысячелетия проблема простатита требует нового осмысления и вызывает необходимость поиска рациональных подходов к его диагностике и лечению. Острый и хронический бактериальный простатит занимает два первых места в классификации простатитов Нацинального института здоровья США [1]. Однако определение этиологического агента, а тем боле микст-ифекции при простатите (уретрите, орхите) представляет проблему при клиническом или амбулаторном бактериологическом обследовании. Многие микроорганизмы, например, анаэробы и другие трудно культивируемые (коринеформы, микобактерии, микроскопические грибы) избегают детектирования современными методами клинической микробиологии. Их присутствие в семени и жидкости простаты становится известным лишь благодаря уникальным научным исследованиям, доступным специализированным научным лабораториям. Их результатом являются, соответственно,   единичные публикации в научной периодике. В изязвлениях мужских половых органов найдены аэробные и анаэробные бактерии, Mycoplasma, Нaemophylus ducrey, Treponema pallidum, Herpes simplex virus, дрожжи и нитчатые грибы. В семени мужчин, страдающих бесплодием, обнаружены E.coli, Staphylococcus, Pseudomonas, Klebsiella, Enterobacter, Bacillus, Neisseria, Corinebacterium, Micrococcus, Proteus, Achromobacter , а также микроскопические грибы [3]. Секвенирование ДНК секрета и биоптатов простаты свидетельствует о наличии в них микроорганизмов, отличающихся от микробиоты кожи и прямой кишки, и, следовательно, не обнаруживаемых традиционными методами  [4]. Действительно, секвенирование клонов ПЦР по 16sРНК позволило авторам другой работы определить в семени наличие 15 видов необычных анаэробов родов Peptostreptococcus, Prevotella, Corinebacterium, Rubrivirax, Actinobacillus, Veilonella и  Eubacterium, а также трех аэробов: Streptococcus salivarius, S.pneumoniae и Burkholderia picketii [5].  Как неожиданность воспринимается авторами обнаружение в секрете простаты превалирующего количества недектируемых в обычной клинической практике коринеформных бактерий, причем в сложном сообществе с Staphylococcus, Peptostreptococcus, Streptococcus и Escherichia, состав которого различен у разных пациентов. Кроме того, обнаружены  микробные ассоциации и у здоровых мужчин, однако иные, чем у больных и в меньшей концентрации [6].  Следует отметить важное для диагностики инфекции обстоятельство, которое состоит в том, что микробные колонии могут быть локализованы в полисахаридных капсулх. Как показали электронно-микроскопические исследования, они покрывают стенки простаты и протоки при хроническом бактериальном простатите [ 7 ].
Методом газовой хроматографии в комбинации с масс-спектрометрией (ГХ-МС) изучен состав жирных кислот (ЖК), оксикислот и альдегидов, входящих в состав липидов мочи и эякулята мужчин. Предпринята попытка на превалирующем фоне липидных компонентов организма человека выявить специфические химические компоненты (маркеры ) микроорганизмов (без предварительной инкубации пробы), колонизирующих и инфицирующих эти органы, и соотнести их с их конкретными родами и видами. При этом привлечены известные сведения о синтезе жирных кислот клетками микроорганизмов и человека, известные из литературных данных. Характер статистических изменений концентраций жирных кислот в 140 пробах мочи и 100 пробах эякулята показывает, что вещества предположительно микробного происхождения имеют более широкий диапазон количественных изменений, выходящий за пределы значений, характерных для здоровых людей, при различных патологиях УГТ и коррелирующие в ряде случаев с диагнозом заболевания или данными традиционного бактериологического обследования. Количество ЖК микробного происхождения колеблется от 0,1 до 10000нГ/мл в зависимости от вещества и состояния микробного ценоза локуса (норма или воспалительный процесс). Для измерения малых концентраций микробных маркеров на превалирующем фоне компонентов биологической жидкости разработан метод подготовки пробы и анализа методом ГХ-МС в режиме селективных ионов (масс-фрагментографии). Достоверность отнесения данных маркерного анализа подтверждена отличием состава микроорганизмов УГТ в норме и патологии, корреляцией с клиникой патологических отклонений, уменьшением (до нуля или нормального значения) концентраций  маркеров патогенов в результате лечения антибиотиками, а также адекватностью состава микроорганизмов УГТ, определенного методом маркеров и культурально-биохимическим (по литературным данным). Предложенный метод оценки состояния биоза УГТ по данным анализа химических маркеров микроорганизмов может быть перспективным вследствие его экспрессности (определение всех маркеров в одном цикле анализа за 2,5 часа), прямой количественной связи концентрации маркера с количеством микроорганизмов, отсутствия необходимости культивирования пробы, независимость от физиологических, биохимических и прочих факторов, препятствующих традиционной культурально-биохимической и молекулярной диагностике ряда условно-патогенных микроорганизмов — комменсалов человека.


Норма – желтый столбик справа

Добавить комментарий